大鼠轉(zhuǎn)化生長因子β1(TGF-β1)ELISA試劑盒操作及性能
l 本試劑盒用于體外定量檢測血清、血漿、組織勻漿及相關(guān)液體樣本中大鼠轉(zhuǎn)化生長因子β1(TGF-β1)的含量。
l 有效期:6個月
l 保存條件:2-8℃
操作步驟
- 從室溫平衡20min后的鋁箔袋中取出所需板條,剩余板條用自封袋密封放回4℃。
- 設(shè)置標(biāo)準(zhǔn)品孔和樣本孔,標(biāo)準(zhǔn)品孔各加不同濃度的標(biāo)準(zhǔn)品50μL;
- 樣本孔中加入待測樣本50μL;空白孔不加。
- 除空白孔外,標(biāo)準(zhǔn)品孔和樣本孔中每孔加入辣根過氧化物酶(HRP)標(biāo)記的檢測抗體100μL,用封板膜封住反應(yīng)孔,37℃水浴鍋或恒溫箱溫育60min。
- 棄去液體,吸水紙上拍干,每孔加滿洗滌液(350μL),靜置1min,甩去洗滌液,吸水紙上拍干,如此重復(fù)洗板5次(也可用洗板機(jī)洗板)。
- 每孔加入底物A、B各50μL,37℃避光孵育15min。
- 每孔加入終止液50μL,15min內(nèi),在450nm波長處測定各孔的OD值。
實驗結(jié)果計算
以所測標(biāo)準(zhǔn)品的OD值為橫坐標(biāo),標(biāo)準(zhǔn)品的濃度值為縱坐標(biāo),在坐標(biāo)紙上或用相關(guān)軟件繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線,并得到直線回歸方程,將樣品的OD值代入方程,計算出樣品的濃度。
試劑盒性能
- 檢測范圍:2.5 ng/mL – 80 ng/mL。
- 靈敏度:低檢測濃度小于0.1 ng/mL。
- 特異性:不與其它可溶性結(jié)構(gòu)類似物交叉反應(yīng)。
- 重復(fù)性:板內(nèi)變異系數(shù)小于10% ,板間變異系數(shù)小于15% 。