咱們?cè)谶\(yùn)用
ELISA試劑盒96孔板的試驗(yàn)測(cè)定的時(shí)分,常發(fā)現(xiàn)有“邊緣效應(yīng)",也就是外周孔顯色較基地孔深。經(jīng)研究證真實(shí)溫育中的熱力學(xué)梯度也許是根本原因之所。聚苯乙烯本身為不良熱導(dǎo)體,在試驗(yàn)室的常規(guī)ELISA測(cè)定中,將板從室溫(通常在25℃擺布)置于37℃溫箱,板也升溫時(shí),在外周孔與基地孔之間也許存在一熱力學(xué)梯度。因而運(yùn)用水浴或在將反響溶液參加至板孔中時(shí),將板和溶液均加熱至溫育溫度(如37℃),就可以很容易地掃除“邊緣效應(yīng)",而且可進(jìn)步測(cè)定的重復(fù)性。
ELISA試劑盒還有就是在試驗(yàn)中,必定有運(yùn)用微量加樣器參加樣本的步驟。提示留意:加樣不行太快,要防止加在孔壁上部,不行濺出和發(fā)生氣泡。ELISA試劑盒太快的話無法保證微量加樣的準(zhǔn)確性和均一性。加在孔壁上部的非包被區(qū),易致使非特異吸附。濺出會(huì)對(duì)附近孔發(fā)生污染。出現(xiàn)氣泡則反響液界面有區(qū)別。所以,有時(shí)分一份標(biāo)本用一樣的試劑盒這次測(cè)定為陽性,下次測(cè)定為陰性,通常就是上述加樣及試劑的過錯(cuò)所造成的。
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