小鼠ELISA試劑盒是通過(guò)酶聯(lián)免疫吸附反應(yīng)進(jìn)行實(shí)驗(yàn)來(lái)檢測(cè)特定物質(zhì)的試劑盒,試劑盒中會(huì)有不同濃度的標(biāo)準(zhǔn)樣品,在酶標(biāo)條中通過(guò)固相的抗原或抗體,酶標(biāo)記的抗原或抗體,酶作用的底物反應(yīng)可形成標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn),從而進(jìn)行試驗(yàn)樣品的測(cè)定。
小鼠ELISA試劑盒可用作ELISA測(cè)定的標(biāo)本十分廣泛,體液、分泌物和排泄物等均可作標(biāo)本,以測(cè)定其中某種抗體或抗原成份。有些標(biāo)本可直接進(jìn)行測(cè)定(如血清、尿液),有些則需經(jīng)預(yù)處理(如糞便和某些分泌物)。大部分ELISA檢測(cè)均以血清為標(biāo)本。血漿中除尚含有纖維蛋白原和抗凝劑外,其他成份均同等于血清。制備血漿標(biāo)本需借助于抗凝劑,而血清標(biāo)本只要待血清自然凝固收縮后即可取得。除特殊情況外,在醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)中均以血清作為檢測(cè)標(biāo)本。在ELISA中血漿和血清可同等應(yīng)用。血清標(biāo)本可按常規(guī)方法采集,應(yīng)注意避免溶血,紅細(xì)胞溶解時(shí)會(huì)釋放出具有過(guò)氧化物酶活性的物質(zhì),以HRP為標(biāo)記的ELISA測(cè)定中,溶血標(biāo)本可能會(huì)增加非特異性顯色。
小鼠ELISA試劑盒辨別優(yōu)劣的方法:
1. 選定一個(gè)檢測(cè)范圍內(nèi)的濃度做多孔重復(fù),可看出平行性好不好。即板內(nèi)CV值的大小,此操作時(shí)需要小心加樣的準(zhǔn)確性。對(duì)一些制作較粗糙的試劑盒來(lái)說(shuō),板間CV值是較大的。
2. 可采用已知濃度的重組細(xì)胞因子,稀釋到檢測(cè)范圍內(nèi)作為樣本加入,看檢測(cè)的準(zhǔn)確性。
3. 對(duì)用待測(cè)指標(biāo)的重組細(xì)胞因子做試劑盒說(shuō)明書(shū)上標(biāo)定的zui小濃度稀釋?zhuān)蓽y(cè)出靈敏度,建議5個(gè)復(fù)孔以上才有意義。一般廠(chǎng)家以20個(gè)復(fù)孔做出的結(jié)果作為檢測(cè)限。用此實(shí)驗(yàn)可驗(yàn)證出所購(gòu)試劑盒的靈敏度是否如說(shuō)明書(shū)所述,也可判斷出所購(gòu)試劑盒是否有夸大之說(shuō)。
4. 如果有相同指標(biāo)的小鼠ELISA試劑盒,可用對(duì)方的標(biāo)準(zhǔn)品作為樣本,分別加入各自的試劑盒做檢測(cè),以檢測(cè)試劑盒的真實(shí)性,準(zhǔn)確性。如其中一種是的,比較可靠的話(huà),可作為標(biāo)準(zhǔn)來(lái)驗(yàn)證另一試劑盒的準(zhǔn)確程度。